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说话：Eng
生化试剂盒
- 总糖含量试剂盒-可见分光光度法
-
测定意思：
糖类物质是组成植物体的沉要组成成分之一，，，，，，，也是新陈代谢的重要原料和贮存物质 。。 。。。。总糖也可称为碳水化合物，，，，，，，蕴含可溶性的单糖，，，，，，，二糖以及不溶性的淀粉，，，，，，，纤维素，，，，，，，几丁质等 。。 。。。。
| 中文名称 |
总糖含量试剂盒 |
| 规格 | 48样 |
| 货号 |
E-318-SH |
| 价值 | ￥280 |
| 样本类型 | 血清，，，，，，，血浆，，，，，，，组织匀浆，，，，，，，细胞裂解液、细胞造就上清液等 |
| 检测领域 | 详见说明书 |
| 检测步骤 |
可见分光光度法 |
| 货期 | 3-5天 |
| 说明书 | 征询我司业务员获取 |
| 文件 |
征询我司业务员获取 |
测定意思：
糖类物质是组成植物体的沉要组成成分之一，，，，，，，也是新陈代谢的重要原料和贮存物质 。。 。。。。总糖也可称为碳水化合物，，，，，，，蕴含可溶性的单糖，，，，，，，二糖以及不溶性的淀粉，，，，，，，纤维素，，，，，，，几丁质等 。。 。。。。
测定道理：
总糖酸水解为还原糖，，，，，，，在NaOH和丙三醇存鄙人，，，，，，，DNS试剂与还原糖共热后被还原成氨基化合物，，，，，，，在过量的NaOH碱性溶液中呈桔红色，，，，，，，在540nm处有最大吸收峰，，，，，，，以此测定样品中的总糖含量 。。 。。。。
注 意 ：正式测定前请选择2-3个预期差距较大的样本做预测定
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、沸水浴、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水 。。 。。。。
试剂的组成和配造：
试剂一：液体100mL×1瓶，，，，，，，4℃保留；；；；；；
试剂二：液体100mL×1瓶 ，，，，，，，4℃保留；；；；；；
试剂三：液体5mL×1瓶 ，，，，，，，4℃避光保留；；；；；；
样品中总糖的提取：
组织：称取约0.1g样品，，，，，，，参与1mL 试剂一，，，，，，，1.5mL蒸馏水，，，，，，，匀浆，，，，，，，95℃水浴中加热30min，，，，，，，参与1mL试剂二，，，，，，，混匀，，，，，，，用蒸馏水定容至10mL，，，，，，，8000g 25℃离心10min，，，，，，，取上清液待测 。。 。。。。（把稳稀释，，，，，，，见当苦衷项）
液体样本：取0.1mL样本，，，，，，，参与1mL 试剂一，，，，，，，1.5mL蒸馏水，，，，，，，匀浆，，，，，，，95℃水浴中加热30min，，，，，，，参与1mL试剂二，，，，，，，8000g 25℃离心10min，，，，，，，取上清液待测 。。 。。。。（把稳稀释，，，，，，，见当苦衷项）
测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，，，，，，，调节波长至540nm，，，，，，，蒸馏水调零 。。 。。。。
2、调节水浴锅至95度 。。 。。。。
3、加样表：
|
试剂（μL） |
空缺管 |
测定管 |
|
样本 |
|
8 |
|
蒸馏水 |
16 |
8 |
|
试剂三 |
12 |
12 |
混匀，，，，，，，置95度水浴中10min（盖紧，，，，，，，以预防水分消散），，，，，，，冷却至室温
|
蒸馏水 |
172 |
172 |
混匀，，，，，，，540nm测定吸光值，，，，，，，ΔA=A测定管-A空缺管
把稳：1、空缺管只有做一管 。。 。。。。
2、若是ΔA大于2，，，，，，，必要将上清液用蒸馏水稀释，，，，，，，推算公式中乘以相应稀释倍数 。。 。。。。
总糖含量推算：
1、尺度前提下测定的回归方程为y = 0.3002x - 0.0507；；；；；；x为尺度品浓度（mg/mL），，，，，，，y为吸光值 。。 。。。。
2、按样本鲜沉推算：
总糖（mg /g鲜沉）= [(ΔA＋0.0507) ÷0.3002×V1]÷（W×V1÷V2）×稀释倍数=33.311×(ΔA＋0.0507) ÷W×稀释倍数 。。 。。。。
3、按样本蛋白浓度推算：
总糖（mg /mg prot）=[(ΔA＋0.0507) ÷0.3002×V1]÷(V1×Cpr) ×稀释倍数=3.3311×(ΔA＋0.0507) ÷Cpr×稀释倍数 。。 。。。。
V1：参与样本体积，，，，，，，0.008mL；；；；；；V2：参与提取液体积，，，，，，，10mL；；；；；； Cpr：样本蛋白质浓度，，，，，，，mg/mL；；；；；；W：样本鲜沉，，，，，，，g 。。 。。。。
4、依照液体体积推算：
总糖（mg /mL）=[(ΔA＋0.0507) ÷0.3002×V1]÷（V3×V1÷V2）×稀释倍数=116.59×(ΔA＋0.0507)×稀释倍数 。。 。。。。
V1：参与样本体积，，，，，，，0.008mL；；；；；；V2：参与提取液体积，，，，，，，10mL/3.5mL；；；；；； V3:液体样本，，，，，，，0.1mL；；；；；；Cpr：样本蛋白质浓度，，，，，，，mg/mL；；；；；；W：样本鲜沉，，，，，，，g 。。 。。。。
把稳：最低检测限为1mg/g鲜沉或10ng/mg prot
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