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说话：Eng
生化试剂盒
- 葡萄糖含量试剂盒-可见分光光度法
-
测定道理：
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，，，，，并产生过氧化氢； ；；；；过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚，，，，，天生有色化合物，，，，，在505 nm有特点吸收峰。。 。。 。。
| 中文名称 |
葡萄糖含量试剂盒 |
| 规格 | 48样 |
| 货号 |
E-318-SH |
| 价值 | ￥700 |
| 样本类型 | 血清，，，，，血浆，，，，，组织匀浆，，，，，细胞裂解液、细胞造就上清液等 |
| 检测领域 | 详见说明书 |
| 检测步骤 |
可见分光光度法 |
| 货期 | 3-5天 |
| 说明书 | 征询我司业务员获取 |
| 文件 |
征询我司业务员获取 |
注 意 ：正式测定前务必取2-3个预期差距较大的样本做预测定
测定意思：
葡萄糖不仅是细胞能量代谢的重要底物，，，，，并且其代谢中央产品是生物合成的沉要底物。。 。。 。。植物可通过光合作用产生葡萄糖。。 。。 。。就哺乳动物而言，，，，，葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的唯一能源，，，，，并且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成亲昵有关。。 。。 。。
测定道理：
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，，，，，并产生过氧化氢； ；；；；过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚，，，，，天生有色化合物，，，，，在505 nm有特点吸收峰。。 。。 。。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵和蒸馏水
试剂的组成和配造：
试剂一：0.5μmol/mL葡萄糖溶液10mL×1瓶，，，，，4℃保留； ；；；；
试剂二：液体 25ml×1瓶，，，，，4℃保留； ；；；；
试剂三：液体 25ml×1瓶，，，，，4℃保留； ；；；；（若出现结冰景象，，，，，可37℃水浴溶化后使用）
葡萄糖提取：
1、组织的处置：依照组织质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，，，，，参与1mL蒸馏水），，，，，研磨成匀浆，，，，，95℃水浴10分钟（盖紧，，，，，预防水分消散），，，，，冷却后，，，，，8000g，，，，，25℃离心10min，，，，，取上清液备用。。 。。 。。
2、细菌或细胞处置：网络细菌或细胞到离心管内，，，，，离心后弃上清； ；；；；依照细菌或细胞数量（104个）：蒸馏水体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞参与1mL蒸馏水），，，，，超声波破碎细菌或细胞（冰。。 。。 。。，，，功率20％或200W，，，，，超声3S，，，，，距离10S，，，，，沉复30次），，，，，95℃水浴10分钟（盖紧，，，，，预防水分消散），，，，，冷却后，，，，，8000g，，，，，25℃离心10min，，，，，取上清液备用。。 。。 。。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，，，，，调节波长至505nm，，，，，蒸馏水调零。。 。。 。。
2、混合试剂的配造：使用前将试剂二和试剂三1:1等体积混合，，，，，用几多配几多。。 。。 。。
3、加样表（在EP管中参与下列试剂）：
|
试剂（μL） |
空缺管 |
尺度管 |
测定管 |
|
样本 |
|
|
100 |
|
试剂一 |
|
100 |
|
|
蒸馏水 |
100 |
|
|
|
混合试剂 |
900 |
900 |
900 |
混匀，，，，，置37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴中，，，，，保温15min，，，，，于505nm波利益读取吸光度。。 。。 。。空缺管、尺度管和测定管吸光值别离记为A1、A2和A3。。 。。 。。浚？？ ？？杖惫芎统叨裙苤挥凶鲆还。。 。。 。。
葡萄糖含量推算：
1、按样本蛋白浓度推算
葡萄糖含量(?mol/mg prot)=(C尺度×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(V1×Cpr)=0.5×(A3-A1)÷
(A2-A1)÷Cpr。。 。。 。。
2、按样本鲜沉推算
葡萄糖含量（?mol/g 鲜沉）= (C尺度×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=0.5×(A3-A1)÷
(A2-A1)÷W
3、按细菌或细胞密度推算
葡萄糖含量（?mol/ 104 cell)= (C尺度×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(500×V1÷V2)=0.001×(A3-A1)÷
(A2-A1)
C尺度：尺度管浓度，，，，，0.5?mol/mL； ；；；；V1：参与样本体积，，，，，0.1mL； ；；；；V2：参与提取液体积，，，，，1mL； ；；；； Cpr：样本蛋白质浓度，，，，，mg/mL； ；；；；W：样本鲜沉，，，，，g； ；；；；500：细菌或细胞总数，，，，，500万。。 。。 。。
把稳：
1、最低检测限为50nmol/g鲜沉或0.5nmol/mg prot
2、若样本中存在葡萄糖氧化酶抑造剂，，，，，则会造成测定了局偏低，，，，，建议改用HPLC法测定。。 。。 。。
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