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生化试剂盒
- 超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒-WST-8法
- 上海腾博官网生物从事酶联免疫学10年有余，， ， ，， ，， ，技术成熟，， ， ，， ，， ，产品不变。。。。。。。。腾博官网品牌自主研发ELISA试剂盒，， ， ，， ，， ，现已涵盖20多个种属，， ， ，， ，， ，数千种产品，， ， ，， ，， ，涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个钻研领域。。。。。。。。其ELISA试剂盒不仅检测指标丰硕，， ， ，， ，， ，还能够凭据尝试需要定造检测领域，， ， ，， ，， ，并且提供尝试表包与免费代测服务。。。。。。。；；；；；；；队吹缯餮。。。。。。。。
| 中文名称 |
超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒-WST-8法 |
| 规格 | 96样 |
| 货号 |
A-002-SH |
| 价值 | ￥700 |
| 样本类型 | 血清，， ， ，， ，， ，血浆，， ， ，， ，， ，组织匀浆，， ， ，， ，， ，细胞裂解液、细胞造就上清液等 |
| 检测领域 | 详见说明书 |
| 检测步骤 |
微板法 |
| 货期 | 3-5天 |
| 说明书 | 征询我司业务员获取 |
| 文件 |
征询我司业务员获取 |
注 意：正式测定前务必取 2-3 个预期差距较大的样本做预测定
测定意思：
SOD（EC 1.15.1.1）宽泛存在于动物、植物、微生物和造就细胞中，， ， ，， ，， ，催化超氧化物阴离子产生岐化作用，， ， ，， ，， ，天生 H2O2 和 O2。。。。。。。。SOD 不仅是超氧化物阴离子断根酶，， ， ，， ，， ，也是 H2O2 重要天生酶，， ， ，， ，， ，在生物抗氧化系统中拥有沉要作用。。。。。。。。
测定道理：
通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反映系统产生超氧阴离子(O2-)，， ， ，， ，， ，O2-可与 WST-8 反映产生水溶性染料甲臜，， ， ，， ，， ，后者在 450nm 处有吸收；；；；；；；SOD 可断根 O2-，， ， ，， ，， ，从而抑造了甲臜的形成；；；；；；；反映液黄色越深，， ， ，， ，， ，注明 SOD 活性愈低，， ， ，， ，， ，反之活性越高。。。。。。。。
需自备的仪器和用品：
酶标仪、离心理、移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水
试剂的组成和配造：
提取液：液体 100mL×1 瓶，， ， ，， ，， ，4℃保留；；；；；；；
试剂一：液体 20mL×1 瓶，， ， ，， ，， ，4℃避光保留；；；；；；；
试剂二：液体 150μL×1 支，， ， ，， ，， ，4℃避光保留；；；；；；；
试剂三：液体 100μL×1 支，， ， ，， ，， ，4℃保留；；；；；；；
试剂四：粉剂×2 瓶，， ， ，， ，， ，4℃保留。。。。。。。。
粗酶液提。。。。。。。。
1、细菌、细胞或组织样品的造备：
细菌或造就细胞：先网络细菌或细胞到离心管内，， ， ，， ，， ，离心后弃上清；；；；；；；依照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞参与 1mL 提取液），， ， ，， ，， ，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，， ， ，， ，， ，功率 20％或 200W，， ， ，， ，， ，超声 3s，， ， ，， ，， ，距离 10s，， ， ，， ，， ，沉复 30 次）；；；；；；； 8000g 4℃离心 10min，， ， ，， ，， ，取上清，， ， ，， ，， ，置冰上待测。。。。。。。。
组织：依照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，， ， ，， ，， ，参与 1mL 提取液），， ， ，， ，， ，进行冰浴匀浆。。。。。。。。8000g 4℃离心 10min，， ， ，， ，， ，取上清，， ， ，， ，， ，置冰上待测。。。。。。。。
2、血清（浆）样品：直接检测。。。。。。。。
测定步骤：
1、 酶标仪预热 30min 以上，， ， ，， ，， ，调节波长至 450nm。。。。。。。。
2、 试剂三的稀释：将试剂三用蒸馏水稀释 50 倍，， ， ，， ，， ，用几多配几多。。。。。。。。（试剂三和蒸馏水 1：49稀释。。。。。。。。
3、 工作液配造：在试剂一参与 100μL 试剂二，， ， ，， ，， ，充分混匀。。。。。。。。配好的试剂 4℃避光可保留一周。。。。。。。。（若一次性测定样本较少，， ， ，， ，， ，可依照现实用量将试剂一和试剂二依照 20mL：0.1mL 的比例混匀配造）
4、 将一瓶试剂四用 5mL 蒸馏水溶化（溶化后一周内用完）。。。。。。。。
5、 样本测定（在 96 孔板中顺次参与下列试剂）
|
试剂名称（μL） |
测定管 |
对照管 |
|
样本 |
10 |
|
|
蒸馏水 |
|
10 |
|
试剂三（稀释后） |
10 |
10 |
|
工作液 |
160 |
160 |
|
试剂四 |
20 |
20 |
充分混匀，， ， ，， ，， ，室温静置 30min 后，， ， ，， ，， ，450nm 处测定各管吸光值 A。。。。。。。。
当苦衷项：
1、试剂三为酶，， ， ，， ，， ，不成冷冻，， ， ，， ，， ，使用时在冰上搁置。。。。。。。。
2、对照管只必要做一管。。。。。。。。
3、SOD 为什么有的样本测定管大于对照管，， ， ，， ，， ，对照管数值在什么领域？ ？？？？
对照管的领域是 0.4-1。。。。。。。。对照管吸光值过低可能是（1）试剂三活性低，， ， ，， ，， ，能够适当削减稀释倍数；；；；；；；（2)没有按挨次加试剂；；；；；；；（3）反映功夫不够，， ， ，， ，， ，能够耽搁反映功夫（反映功夫 30min能够耽搁到 40min）。。。。。。。。对照管吸光值过高可能是试剂三未按操作说明书稀释相应倍数。。。。。。。。若出现测定管大于对照管，， ， ，， ，， ，可能是样本中杂质的影响太大，， ， ，， ，， ，为了降低杂质的影响通常将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10 倍后再测，， ， ，， ，， ，通？ ？？？Ｄ芄皇共舛ㄕ。。。。。。。。推算公式中乘以相应稀释倍数。。。。。。。。
SOD 活性推算：
1、抑造百分率的推算
抑造百分率＝(A 对照管－A 测定管) ÷A 对照管× 100%
尽量使样本的抑造百分率在 10-90%领域内。。。。。。。。若是推算出来的抑造百分率幼于 10%或大于90%，， ， ，， ，， ，则通常必要调整加样量后沉新测定。。。。。。。。若是测定出来的抑造百分率偏高，， ， ，， ，， ，则需将样本用提取液适当稀释；；；；；；；若是测定出来的抑造百分率偏低，， ， ，， ，， ，则需沉新筹备浓度比力高的待测样本。。。。。。。。
2、SOD 酶活性单元：
3、在上述黄嘌呤氧化酶藕联反映系统中抑造百分率为 50%时，， ， ，， ，， ，反映系统中的 SOD 酶活力界说为一个酶活力单元(U/mL)。。。。。。。。
3、SOD 酶活性推算：
（1）血清（浆）SOD 活性(U/mL)=[抑造百分率÷(1－抑造百分率)×V 反总]÷V 样=20×抑造百分率÷(1－抑造百分率)
（2）组织、细菌或造就细胞 SOD 活力推算：
a.按样本蛋白浓度推算
SOD 活性(U/mg prot)=[抑造百分率÷(1－抑造百分率)×V 反总]÷(V 样×Cpr)
=20×抑造百分率÷(1－抑造百分率)÷Cpr必要另表测定，， ， ，， ，， ，建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。。。。。。。。
b.按样本鲜沉推算
SOD 活性(U/g 鲜沉)=[抑造百分率÷(1－抑造百分率)×V 反总]÷(W ×V 样÷V 样总) =20×抑造百分率÷(1－抑造百分率)÷W
c.按细菌或细胞个数推算
SOD 活力(U/104 cell)=[抑造百分率÷(1－抑造百分率) ×V 反总]÷(500×V 样÷V 样总)
=0.04×抑造百分率÷(1－抑造百分率)
V反总：反映系统总体积，， ， ，， ，， ，0.2mL；；；；；；；V 样：参与反映系统中样本体积，， ， ，， ，， ，0.01mL；；；；；；；
V 样总：参与提取液体积，， ， ，， ，， ，1 mL；；；；；；；Cpr：样本蛋白质浓度，， ， ，， ，， ，mg/mL ；；；；；；；W：样性质量，， ， ，， ，， ，g；；；；；；；500：细胞或细菌总数，， ， ，， ，， ，500 万。。。。。。。。
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