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说话:Eng

| 中文名称 |
甘油三酯(TG)含量试剂盒-可见分光光度法 |
| 规格 | 48样 |
| 货号 |
L-740-SH |
| 价值 | ¥800 |
| 样本类型 | 血清,,,,,,,,血浆,,,,,,,,组织匀浆,,,,,,,,细胞裂解液、细胞造就上清液等 |
| 检测领域 | 详见说明书 |
| 检测步骤 |
可见分光光度法 |
| 货期 | 3-5天 |
| 说明书 | 征询我司业务员获取 |
| 文件 | 征询我司业务员获取 |
注 意 :正式测定之前选择2-3个预期差距大的样本做预测定。。。。。。。
测定意思:
TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,,,,,,,,不仅是细胞膜的重要成分,,,,,,,,也是沉要呼吸底物。。。。。。。
测定道理:
用异丙醇提取TG,,,,,,,,脂蛋白酯酶水解TG天生甘油和脂肪酸(FFA),,,,,,,,甘油与三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下天生H2O2,,,,,,,,过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚,,,,,,,,天生有色化合物,,,,,,,,在505 nm处有特点吸收峰。。。。。。。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心理、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水
试剂组成和配置:
试剂一:液体60 mL×1瓶,,,,,,,,4℃保留。。。。。。。
试剂二:液体26 mL×1瓶,,,,,,,,4℃保留。。。。。。。
试剂三:液体26 mL×1瓶,,,,,,,,4℃避光保留。。。。。。。
TG的提取。。。。。。
1、 组织中TG的提取。。。。。。阂勒兆橹柿浚g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,,,,,,,,参与1mL试剂一)进行冰浴匀浆,,,,,,,,8000g,,,,,,,,4℃离心10min,,,,,,,,取上清,,,,,,,,即TG待测液。。。。。。。
2、细胞、细菌中TG的提取。。。。。。先网络400-500万细胞或细菌到离心管内,,,,,,,,离心后弃上清,,,,,,,,加1mL试剂一,,,,,,,,超声波破碎1min(强度20%,,,,,,,,超声2s,,,,,,,,停1s),,,,,,,,8000g,,,,,,,,4℃离心10min,,,,,,,,取上清,,,,,,,,即TG待测液。。。。。。。
3、血清(浆)样品:直接测定。。。。。。。
测定操作:
可见分光光度计预热30min,,,,,,,,调节波长到505 nm。。。。。。。
|
试剂(μL) |
空缺管 |
测定管 |
|
样本 |
|
50 |
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试剂一 |
50 |
|
|
试剂二 |
475 |
475 |
|
试剂三 |
475 |
475 |
混匀,,,,,,,,室温下静置20min,,,,,,,,于505 nm波利益读取吸光值,,,,,,,,记为A空白和A测定,,,,,,,,△A=A测定-A空缺。。。。。。????????杖惫苤恍璨庖还堋。。。。。。
推算公式:
尺度曲线:y = 0.6522x - 0.0199;;;;;;; R2 = 0.9979;;;;;;;x:尺度品浓度(mg/mL) y:吸光值差值ΔA。。。。。。。
1. 血清(浆)中甘油三酯含量推算:
TG含量(mg/mL)=(ΔA+0.0199)÷0.6522=1.533×(ΔA+0.0199)
2. 组织、细菌或细胞中甘油三酯含量推算:
(1)按样本蛋白浓度推算
TG含量(mg/ mg prot)= (ΔA+0.0199)÷0.6522×V样÷(Cpr×V样)=1.533×(ΔA+0.0199)÷Cpr
(2)按样本质量推算
TG含量(mg/ g 鲜沉)=(ΔA+0.0199)÷0.6522×V样÷(W×V样÷V样总)=1.533×(ΔA+0.0199)÷ W
V样:参与样本体积,,,,,,,,0.01 mL;;;;;;;V样总:参与试剂一体积,,,,,,,,1 mL;;;;;;;W:样本质量,,,,,,,,g;;;;;;;
Cpr:样本蛋白质浓度,,,,,,,,mg/mL。。。。。。。
当苦衷项:
1. 试剂盒中有易挥发性物质,,,,,,,,尝试过程中需佩带手套和口罩,,,,,,,,试剂瓶盖打开后应该实时盖紧。。。。。。。
2. 最低检出限为100μg/mL。。。。。。。
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