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| 中文名称 |
活性氧(ROS)测定试剂盒(化学荧光法) |
| 规格 | 100T-500T |
| 货号 |
P-846-SH |
| 价值 | ¥700 |
| 样本类型 | 血清,,,,,,血浆,,,,,,组织匀浆,,,,,,细胞裂解液、细胞造就上清液等 |
| 检测领域 | 详见说明书 |
| 检测步骤 |
化学荧光法 |
| 货期 | 3-5天 |
| 说明书 | 征询我司业务员获取 |
| 文件 | 征询我司业务员获取 |
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差距较大的样本做预测定
测定意思:
查尔酮异构酶(Chalcone isomerase, CHI)是第一个被意识的黄酮类化合物合成有关酶,,,,,,也是黄酮代谢蹊径中的关键酶之一。。。。。。查尔酮异构酶和查尔酮合酶一路组成了黄酮类化合物生物合成的限速酶。。。。。。
测定道理:
查尔酮异构酶(CHI)催化查尔酮环化形成 4,5,7-三羟基黄烷酮,,,,,,通过测定381nm下的吸光度变动暗示CHI的活性。。。。。。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心理、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水
试剂的组成:
提取液:液体60mL×1瓶,,,,,,4℃保留;;;;;
试剂一:液体60mL×1瓶,,,,,,4℃保留;;;;;
试剂二:粉剂×1瓶,,,,,,4℃保留;;;;;用时参与50mL试剂一充分溶化待用;;;;;用不完的试剂4℃保留。。。。。。
粗酶液提。。。。。。
组织:依照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,,,,,,参与1mL提取液),,,,,,进行冰浴匀浆。。。。。。8000g 4℃离心10min,,,,,,取上清,,,,,,置冰上待测。。。。。。
测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,,,,,,调节波长至381nm,,,,,,蒸馏水调零。。。。。。
2、 样本测定表
在1mL玻璃比色皿中参与50?L上清和950?L试剂二,,,,,,立即混匀并纪录381nm下初始吸光值A1和37℃保温30min后的吸光值A2。。。。。。推算ΔA=A2-A1。。。。。。
CHI活性推算:
(1) 按样本蛋白浓度推算
单元界说:每mg组织蛋白在每mL反映系统中每幼时A381变动0.1为一个酶活力单元。。。。。。
CHI(U/mg prot)=ΔA×V反总÷(V样×Cpr)÷0.1÷T =400×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜沉推算
单元界说:每g组织在每mL反映系统中每幼时A381变动0.1为一个酶活力单元。。。。。。
CHI(U/g 鲜沉)=ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.1÷T =400×ΔA÷W
V反总:反映系统总体积,,,,,,1mL;;;;; V样:参与样本体积,,,,,,0.05mL;;;;;V样总:参与提取液体积,,,,,,1 mL;;;;;T:反映功夫,,,,,,0.5h;;;;;Cpr:样本蛋白质浓度,,,,,,mg/mL;;;;;W:样性质量。。。。。。
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