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说话:Eng

| 中文名称 |
支链淀粉含量试剂盒 |
| 规格 | 96样 |
| 货号 |
E-358-SH |
| 价值 | ¥1500 |
| 样本类型 | 血清,,,,,,,,血浆,,,,,,,,组织匀浆,,,,,,,,细胞裂解液、细胞造就上清液等 |
| 检测领域 | 详见说明书 |
| 检测步骤 |
微板法 |
| 货期 | 3-5天 |
| 说明书 | 征询我司业务员获取 |
| 文件 |
征询我司业务员获取 |
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差距较大的样本做预测定
测定意思:
支链淀粉是拥有高度分支的多糖,,,,,,,,淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉产品的加工、物化个性、糊化温度蹬仔着直接的影响,,,,,,,,对于分歧比例直、支链淀粉的淀粉的钻研拥有沉要的意思。。。。。
测定道理:
利用80%乙醇能够把样品中可溶性糖与淀粉分隔,,,,,,,,利用双波长比色法测定支链淀粉含量。。。。。
需自备的仪器和用品:
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰、乙醚和蒸馏水。。。。。
试剂的组成和配造:
试剂一:液体100mL×1瓶;;;;;;4℃保留;;;;;;
试剂二:乙醚100mL×1瓶;;;;;;4℃保留;;;;;;(自备)
试剂三:液体100mL×1瓶;;;;;;4℃保留;;;;;;
试剂四:液体2mL×1瓶; 4℃保留;;;;;;
试剂五:液体300uL×1瓶; 4℃保留;;;;;;
淀粉提。。。。。
称取0.01~0.02g烘干样本(建议称取约0.01g)于研钵中研碎,,,,,,,,参与1mL试剂一,,,,,,,,充分匀浆后转移到EP管中,,,,,,,,80℃水浴提取30min,,,,,,,,3000g,,,,,,,,25℃离心5min,,,,,,,,弃上清,,,,,,,,留沉淀,,,,,,,,参与1mL试剂二(乙醚)振荡5min,,,,,,,,3000g,,,,,,,,25℃离心5min,,,,,,,,弃上清,,,,,,,,留沉淀,,,,,,,,参与1mL试剂三充分溶化,,,,,,,,90℃水浴10min,,,,,,,,冷却后待测。。。。。
测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,,,,,,,,蒸馏水调零。。。。。
测定管:在96孔板或微量石英比色皿中顺次参与20uL样本,,,,,,,, 14uL试剂四,,,,,,,,120uL蒸馏水,,,,,,,,2uL试剂五,,,,,,,,44uL蒸馏水,,,,,,,,混匀,,,,,,,,别离测定550和743nm处吸光值,,,,,,,,ΔA测定=A550-A743。。。。。
空缺管:在96孔板或微量石英比色皿中顺次参与20uL试剂三,,,,,,,, 14uL试剂四,,,,,,,,120uL蒸馏水,,,,,,,,2uL试剂五,,,,,,,,44uL蒸馏水,,,,,,,,混匀,,,,,,,,别离测定550和743nm处吸光值,,,,,,,,ΔA空缺=A550-A743。。。。。
支链淀粉含量推算:
a. 用微量石英比色皿测定的推算公式如下
尺度前提下测定的回归方程为y=0.1214x+0.0076;;;;;;x为尺度品浓度(mg/mL),,,,,,,,y为吸光值。。。。。
1、依照蛋白浓度推算
支链淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA测定-ΔA空缺-0.0076)×V1]÷0.1214 ÷(V1×Cpr)=8.24×(ΔA测定-ΔA空缺-0.0076) ÷Cpr
2、按样本干沉推算
支链淀粉含量(mg/g干沉)= [(ΔA测定-ΔA空缺-0.0076)×V1] ÷0.1214÷(W×V1÷V2) =8.24×(ΔA测定-ΔA空缺-0.0076) ÷W
V1:参与反映系统中样本体积,,,,,,,,0.02mL;;;;;;V2:参与提取液体积,,,,,,,,1 mL;;;;;;Cpr:样本蛋白质浓度,,,,,,,,mg/mL;;;;;;W:样本质量,,,,,,,,g
b. 用96孔板测定的推算公式如下
尺度前提下测定的回归方程为y= 0.0607x+0.0076;;;;;;x为尺度品浓度(mg/mL),,,,,,,,y为吸光值。。。。。
1、依照蛋白浓度推算
支链淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA测定-ΔA空缺-0.0076)×V1]÷0.0607 ÷(V1×Cpr)=16.47×(ΔA测定-ΔA空缺-0.0076) ÷Cpr
2、按样本干沉推算
支链淀粉含量(mg/g干沉)= [(ΔA测定-ΔA空缺-0.0076)×V1] ÷0.0607÷(W×V1÷V2) =16.47×(ΔA测定-ΔA空缺-0.0076) ÷W
V1:参与反映系统中样本体积,,,,,,,,0.02mL;;;;;;V2:参与提取液体积,,,,,,,,1 mL;;;;;;Cpr:样本蛋白质浓度,,,,,,,,mg/mL;;;;;;W:样本质量,,,,,,,,g
最低检测限为10mg/g干沉或0.1mg/mgprot。。。。。
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