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生化试剂盒

脂肪酸合成酶(FAS)试剂盒-紫表分光光度法
腾博官网生物生化试剂盒利用领域宽泛, ,,,,,涉及酶类、氧化应激、铁殒命、肝职能、肾职能、糖酵解、无机盐离子、脂质代谢、植物抗逆性等。。。。。。检测样本类型丰硕, ,,,,,涉及多种体液、组织、细胞、食品、植物、药物、化妆品等。。。。。。重要的检测仪器为酶标仪, ,,,,,分光光度计和荧光酶标仪。。。。。。我们将以高度的责任感和杰出的产品质量为客户提供高效专业的生化代测服务和尝试技术解决规划。。。。。。丰硕的经验、良好的品质、充足的库存、正确的交货功夫、极具竞争力的价值, ,,,,,所有这些保障了我们向您提供的最专业最优质的服务。。。。。。

中文名称

脂肪酸合成酶(FAS)试剂盒

规格 24样
货号

L-762-SH

价值 ¥2000
样本类型 血清, ,,,,,血浆, ,,,,,组织匀浆, ,,,,,细胞裂解液、细胞造就上清液等
检测领域 详见说明书
检测步骤

紫表分光光度法

货期 3-5天
说明书 征询我司业务员获取
文件 征询我司业务员获取

    正式测定之前选择2-3个预期差距大的样本做预测定。。。。。。

测定意思:

FAS是脂肪酸合成关键酶, ,,,,,催化乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A而天生长链脂肪酸。。。。。。FAS普遍表白于各类组织细胞中, ,,,,,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表白丰硕。。。。。。

 

测定道理:

FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoANADPH天生长链脂肪酸和NADP+;;; ;;; ;;NADPH340nm有吸收峰, ,,,,,而NADP+没有;;; ;;; ;;通过测定340nm 光吸收降落速度, ,,,,,推算FAS活性。。。。。。

 

自备仪器和用品:

研钵、冰、台式离心理、紫表分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。。。。。。

 

试剂组成和配造:

试剂一:液体25mL×1瓶, ,,,,,-20℃保留。。。。。。用前1 d取出置于4℃充分解冻后混匀。。。。。。

试剂二:粉剂×1瓶, ,,,,,4℃保留。。。。。。临用前参与550 μL试剂四, ,,,,,充分溶化, ,,,,,用不完的试剂分装后-20℃保留, ,,,,,不容反复冻融。。。。。。

试剂三:粉剂×1瓶, ,,,,,4℃保留。。。。。。临用前参与550 μL试剂四, ,,,,,充分溶化, ,,,,,用不完的试剂分装后-20℃保留, ,,,,,不容反复冻融。。。。。。

试剂四:液体25mL×1瓶, ,,,,,4℃保留。。。。。。

试剂五:粉剂×1瓶, ,,,,,4℃保留。。。。。。临用前参与1050 μL试剂四, ,,,,,充分溶化, ,,,,,用不完的试剂分装后-20℃保留, ,,,,,不容反复冻融。。。。。。

 

粗酶液提取。。。。。

1. 组织:依照组织质量(g)试剂一(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织, ,,,,,参与1mL试剂一)进行冰浴匀浆。。。。。。12000g, ,,,,,4离心40min, ,,,,,取上清置冰上待测。。。。。。

2. 细菌、真菌:依照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞参与1mL试剂一), ,,,,,冰浴超声波破碎细胞(功率300w, ,,,,,超声3秒, ,,,,,距离7秒, ,,,,,总功夫3min);;; ;;; ;;而后12000g, ,,,,,4℃, ,,,,,离心40min, ,,,,,取上清置于冰上待测。。。。。。

3. 血清等液体:直接测定。。。。。。

 

FAS测定操作:

1. 分光光度计预热30min, ,,,,,调节波长到340 nm, ,,,,,蒸馏水调零。。。。。。

2. 试剂四置于40℃水浴中预热30 min。。。。。。

3. 测定管:在1mL石英比色皿中顺次参与100μL上清液20μL试剂二、20μL试剂三、820μL试剂四和40μL试剂五, ,,,,,迅速混匀后于340nm处测定吸光值, ,,,,,纪录第30s90s时吸光值, ,,,,,别离纪录为A1A2。。。。。。△A=A1-A2。。。。。。

FAS活性推算公式

1)依照蛋白浓度推算

活性单元界说:37℃中每毫克蛋白每分钟氧化1nmol NADPH 1个酶活单元。。。。。。

FAS(nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(Cpr×V)÷T

=1608×△A÷Cpr

2)依照样性质量推算

活性单元界说:37℃中每克组织每分钟氧化1nmol NADPH 1个酶活单元。。。。。。

FAS(nmol/min/g 鲜沉) = (△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(W×V÷V样总)÷T

=1608×△A ÷W

3)按细胞数量推算

活性单元界说:37℃中每104个细胞每分钟氧化1nmol NADPH 1个酶活单元。。。。。。

FAS(nmol /min/104cell) = (△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(细胞数量×V÷V样总)÷T

=1608×△A ÷细胞数量

4)按液体体积推算

活性单元界说:37℃中每毫升样本每分钟氧化1nmol NADPH 1个酶活单元。。。。。。

FAS(nmol /min/mL) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷V÷T

=1608×△A

εNADPH摩尔消光系数, ,,,,,6.22×103/mol/cm;;; ;;; ;;d:比色皿光径, ,,,,,1 cm;;; ;;; ;;V反总:反映系统总体积, ,,,,,1000μL=0.001 L;;; ;;; ;;Cpr:上清液蛋白质浓度, ,,,,,mg/mL;;; ;;; ;;W:样性质量, ,,,,,g;;; ;;; ;;V样:参与反映系统中上清液体积, ,,,,,100μL=0.1 mL;;; ;;; ;;T:反映功夫, ,,,,,1min。。。。。。


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