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行业新闻
BCA法测定蛋白质浓度
【主张】
把握BCA法测定蛋白质浓度的道理。。。。。。。
【道理】
BCA(bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他 试剂 组成的 试剂 ，，，，，，混合一路即成为苹果绿，，，，，，即BCA工作试剂。。。。。。。在碱性前提下，，，，，，BCA与蛋白质结应时，，，，，，蛋白质将Cu2+ 还原为Cu+ ，，，，，，一个Cu+ 螯合二个BCA分子，，，，，，工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物，，，，，，最大光吸收强杜纂蛋白质浓度成正比。。。。。。。
【操作】
尺度曲线的绘造：取 试管 七支、编号，，，，，，按下表操作：
【推算】
（一） 绘造尺度曲线。。。。。。。
（二） 以测定管吸光度值，，，，，，查找尺度曲线，，，，，，求出待测血清中蛋白质浓度(g/L)。。。。。。。
（三） 再从尺度管当选择一管与测定管光密度相靠近者，，，，，，求出待测血清中蛋白质浓度(g/L)。。。。。。。
【优弊端】
(一) 操作单一，，，，，，急剧，，，，，，45分钟内实现测定，，，，，，比经典的Lowary法快4倍且越发方便；；；；；；
(二) 正确活络，，，，，，试剂不变性好，，，，，，BCA试剂的蛋白质测定领域是20-200μg/ml，，，，，，微量BCA测定领域在0.5-10μg/ml。。。。。。。
(三) 经济实用，，，，，，除 试管 表，，，，，，测定可在微板孔中就进行，，，，，，大大节约样品和试剂用量；；；；；；
(四) 抗试剂滋扰能力比力强，，，，，，如去垢剂，，，，，，尿素等均无影响
【器材】
（一） 7220型分光光度计
（二） 恒温 水浴 箱
（三） 中试管7支
（四） 枪式移液管
【试剂】
1、 试剂A：1％BCA二钠盐
2％无水碳酸钠
0.16%酒石酸钠
0.4％氢氧化钠
0.95％碳酸氢钠
混合调PH值至11.25。。。。。。。
2、 试剂B：4％硫酸铜。。。。。。。
3、 BCA工作液：试剂A 100ml ＋ 试剂B 2ml混合
4、 蛋白质尺度液：用结晶牛 血清 白蛋白凭据其纯杜酌生理盐水配造成1.5mg/ml的蛋白质尺度液。。。。。。。（纯度可经凯氏定氮法测定蛋白质含量而确定）
5、 待测样品：用双缩脲测定法的样品稀释而成。。。。。。。
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