PCR技术的操作道理???????
根基道理类似于DNA的天然复造过程,,,,,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。。。。。。。
PCR由变性--退火--延长三个根基反映步骤组成:
①模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一按功夫后,,,,,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,,,,,使之成为单链,,,,,以便它与引物结合,,,,,为下轮反映做筹备;;;;;;;;
②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,,,,,温度降至55℃左右,,,,,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;;;;;;;;
③引物的延长:DNA模板--引物结合物在Taq酶的作用下,,,,,以dNTP为反映原料,,,,,靶序列为模板,,,,,按碱基配对与半保留复造道理,,,,,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复造链。。。。。。。
沉复循环变性--退火--延长三过程,,,,,就可获得更多的“半保留复造链”,,,,,并且这种新链又可成为下次循环的模板。。。。。。。每实现一个循环需2~4分钟,,,,, 2~3颖厩能将待扩主张基因扩增放大几百万倍。。。。。。。
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