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PCR技术的操作道理???????

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PCR技术的操作道理???????


根基道理类似于DNA的天然复造过程,, , ,,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。。。。。。。

PCR由变性--退火--延长三个根基反映步骤组成:
①模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一按功夫后,, , ,,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,, , ,,使之成为单链,, , ,,以便它与引物结合,, , ,,为下轮反映做筹备;;;;;; ;;

②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,, , ,,温度降至55℃左右,, , ,,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;;;;;; ;;

③引物的延长:DNA模板--引物结合物在Taq酶的作用下,, , ,,以dNTP为反映原料,, , ,,靶序列为模板,, , ,,按碱基配对与半保留复造道理,, , ,,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复造链。。。。。。。

沉复循环变性--退火--延长三过程,, , ,,就可获得更多的“半保留复造链”,, , ,,并且这种新链又可成为下次循环的模板。。。。。。。每实现一个循环需2~4分钟,, , ,, 2~3颖厩能将待扩主张基因扩增放大几百万倍。。。。。。。

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